Termenul in vitro Este un termen în latină care înseamnă în sticlă. Se folosește deoarece în primele experimente biologice în care culturile de țesuturi au fost efectuate în afara organismelor vii din care provin, acestea au fost efectuate în recipiente de sticlă, precum eprubete, cilindri sau cutii Petri.

În prezent, termenul in vitro se referă la orice procedură biologică care se efectuează în afara organismului în care ar avea loc în mod normal, pentru a-l deosebi de un experiment in vivo unde țesutul rămâne în organismul viu în care se găsește în mod normal.

În mod colocvial, bebelușii concepuți prin FIV sunt numiți bei eprubetă, referindu-se la recipiente din sticlă sau plastic numite eprubete, care sunt frecvent utilizate în laboratoarele de chimie și biologie.

Cu toate acestea, fertilizarea in vitro se desfășoară în plăci plate numite cutii Petri; cele mai frecvent utilizate farfurii Petri sunt fabricate din plastic, totuși numele FIV este păstrat.

Indicații pentru fertilizarea in vitro

Inițial, FIV a fost dezvoltat pentru a depăși situațiile de infertilitate din cauza problemelor din trompele uterine, dar ulterior s-a observat că tehnica a avut succes și în alte cazuri de infertilitate.

Introducerea injectarea intracitoplasmatică a spermei (ICSI) rezolvă în mare măsură problemele de infertilitate masculină.

Pentru ca un tratament FIV să aibă succes, este necesar să aveți ovocite sănătoase, spermatozoizi care pot fertiliza și un uter care poate menține o sarcină.

Deși în unele țări tratamentele FIV sunt acoperite de serviciile de sănătate socială, această tehnică este utilizată în mod normal atunci când alte opțiuni au eșuat, datorită faptului că FIV suportă costuri ridicate.

FIV poate fi utilizat și la femeile aflate la menopauză, folosind ovocite donatoare. Este, de asemenea, o tehnică care poate fi luată în considerare la pacienții care au suferit o pierdere totală sau parțială a fertilității datorită tratamentului agresiv împotriva unei patologii grave (cum ar fi cancerul).

Metode de fertilizare in vitro

Stimularea ovariană

Fertilizarea in vitro este inițiată în a treia zi a menstruației și constă dintr-un regim de medicamente pentru stimularea dezvoltării mai multor foliculi în ovare.

La majoritatea pacienților, se utilizează injecții cu gonadotropină (în general analogi ai FSH), cu controale frecvente ale nivelurilor de estradiol și ale creșterii foliculare prin ecografie ginecologică.

De obicei, durează 10 zile de injecții. Ovulația spontană în timpul ciclului este prevenită prin utilizarea agoniștilor GnRH sau a antagoniștilor GnRH, care blochează apariția naturală a hormonului luteinizant (LH).

Extracția ovocitelor

Atunci când maturizarea foliculului este considerată adecvată, pacientului i se administrează gonadotropină corionică umană (? -HCG).

Această moleculă, care acționează ca un analog al hormonului luteinizant (LH), va provoca ovulația la aproximativ 36 de ore de la injectare, dar procedura de îndepărtare are loc chiar înainte ca aceasta să aibă loc.

Extracția ovocitelor se realizează transvaginal, utilizând un ac ghidat cu ultrasunete, care perforează peretele vaginal pentru a ajunge la ovare.

Oocitele sunt aspirate prin ac, iar lichidul folicular este transferat în laboratorul de FIV pentru a identifica ouăle. Acesta este un proces complet delicat, extracția durează aproximativ 20 de minute și poate fi efectuată sub anestezie generală sau parțială.

Fertilizare

Odată ajuns în laborator, ovocitele extrase sunt curățate, eliminând celulele care le înconjoară și pregătindu-le pentru fertilizare. În același timp, materialul seminal se pregătește pentru fertilizare, eliminând celulele inactive și lichidul seminal.

Dacă materialul seminal provine de la un donator, acesta va fi probabil pregătit înainte de a fi înghețat și pus în carantină, iar atunci când va fi dezghețat va fi gata de utilizare.

Spermatozoizii și ovocitele sunt incubate împreună (într-un raport de aproximativ 75.000: 1) în mediul de cultură timp de aproximativ 18 ore.

Până atunci ar fi trebuit să se producă fertilizarea, iar ovocitul fertilizat ar trebui să prezinte două pronuclei.

Atunci când numărul de spermatozoizi este scăzut, un singur spermă este injectat direct în ovocit, folosind injectarea intracitoplasmatică a spermei (ICSI).

Oul fertilizat este transferat într-un mediu de cultură special și păstrat timp de aproximativ 48 de ore până când ajunge la stadiul de 6-8 celule.

Cultura embrionară

Odată ce ovulul a fost fertilizat și a fost obținut un zigot, acesta este cultivat pentru a promova diviziunea și creșterea celulară pentru a da naștere unui embrion.

Această cultură durează între 2 și 5 zile și este foarte important ca aceasta să fie efectuată în condiții optime pentru embrion, deoarece calitatea acesteia și rata de implantare a acesteia vor depinde de ea atunci când este transferată într-un uter.

Pentru ca creșterea embrionului să aibă loc în cele mai bune condiții posibile, se utilizează diferite tipuri de mediu de cultură:

Mijloace simple: compoziție simplă și ușor de preparat. Sunt optime pentru creșterea inițială a embrionului (până la 3 zile de cultură). Embrionii sunt de obicei cultivați timp de 3 zile înainte de implantare, după care vor ajunge la un stadiu de 6-8 celule.

Acest lucru permite embriologului să-și monitorizeze rata de diviziune celulară și activarea genei, pentru a se asigura că embrionul este viabil și că va fi implantat corespunzător.

Momentul implantării va fi avansat numai, de obicei după două zile de cultură, când cuplul supus FIV are puțini embrioni disponibili pentru a fi transferați sau când embrionii se dezvoltă lent.

Mass-media complexă: compoziția sa este mai complexă, include vitamine, aminoacizi, metale, ser. Sunt cele mai potrivite pentru creșterea embrionului din ziua 3 până în ziua 5. După cinci zile de cultură, embrionul ajunge la stadiul de blastocist, în care este compus din 12-16 celule și are o rată ridicată de implantare. De obicei, acestea sunt cultivate până în acest stadiu atunci când anterior au existat avorturi sau eșecuri de implantare la pacient.

Medii secvențiale: ia în considerare faptul că embrionul trece prin medii diferite de la momentul în care este fertilizat în trompa uterină până ajunge la uter.

Mediile secvențiale sunt alcătuite din trei tipuri de medii: un mediu pentru prepararea gametilor, altul pentru dezvoltare până în ziua 3 și un al treilea pentru a ajunge la faza de blastocist.

În afară de aceasta, este, de asemenea, foarte important să controlați condițiile de temperatură, lumină și pH.

Selecţie

Laboratoarele specializate în FIV au dezvoltat metode de notare pentru a evalua calitatea ovocitelor și embrionilor. De obicei, experții examinează simetria embrionului, integritatea structurală a celulelor sale și creșterea generală la două până la cinci zile după fertilizare.

Acum oamenii de știință încep să analizeze nu numai embrionul, ci și mediul în care crește. Unele centre folosesc analize chimice și formule matematice pentru a crea o „amprentă metabolică” a unui embrion sănătos, care ar putea fi folosit ca barometru pentru a estima potențialul de supraviețuire al unui embrion.

Alții încearcă să analizeze proteinele secretate de embrioni și să măsoare cantitatea de oxigen consumată, care este un semn obișnuit de creștere. [1]

În mod normal, embrionii care au atins stadiul de 6-8 celule sunt transferați la 3 zile după extracție.

Uneori, însă, embrionii sunt păstrați în cultură pentru o perioadă mai lungă (aproximativ 6 zile), iar transferul are loc în stadiul de blastocist, mai ales dacă se observă mulți embrioni de 3 zile de bună calitate.

Transferurile în stadiu de blastocist prezintă rate mai bune de sarcină.

Transferul embrionilor

Embrionii sunt punctați de către embriolog în funcție de numărul de celule, paritatea creșterii și gradul de fragmentare. În mod normal, pentru a îmbunătăți șansele de implantare și sarcină, mai mulți embrioni sunt transferați simultan.

Numărul de embrioni care sunt transferați depinde de numărul disponibil, de vârsta femeii, de considerațiile de diagnostic și de limitările legale (în unele țări, numărul maxim este limitat la două sau trei).

Embrionii care sunt considerați „mai buni” sunt transferați în uterul femeii printr-un cateter plastic foarte fin, care se introduce prin vagin și colul uterin și este monitorizat prin vizualizare cu ultrasunete.

Ratele de succes

În SUA, rata natalității vii prin FIV este de aproximativ 27% pe ciclu (cu o rată de sarcină de 33%), dar șansele de succes variază foarte mult în funcție de vârsta femeii (sau mai precis, de vârsta ovocitelor utilizate ).

Când se utilizează propriile ovocite (și nu donatoare) ale femeii, la femeile cu vârsta sub 35 de ani rata sarcinii este de aproximativ 43% pe ciclu (36,5% din nașterile vii), în timp ce la femeile de peste 40 de ani rata scade drastic, până la doar 4% pentru femeile de peste 42 de ani.

Alți factori care determină rata de succes includ calitatea ovocitelor și spermei, sănătatea uterului și experiența clinicii.

În mod normal, mai mulți embrioni sunt transferați simultan, pentru a îmbunătăți rata de succes, care are ca contrapartidă riscul de sarcină multiplă.

O tehnică recentă este de a scufunda un embrion într-o cultură de nutrienți timp de 5 zile până când ajunge la stadiul de blastocist. Medicii determină apoi care embrioni sunt cei mai susceptibili să se dezvolte. Cele de o calitate mai bună sunt transferate în uterul femeii.

În acest fel, este posibil să se îmbunătățească rata sarcinii fără a crește riscul de sarcină multiplă. Aceasta este o tehnică relativ nouă și se află în faza de experimentare.

Clinicile cu programe FIV își publică în general ratele de sarcină. Cu toate acestea, este dificil să se facă comparații între clinici, deoarece rezultatele sunt consecința multor variabile. În plus, rezultatele depind mult și de tipul de pacienți selectați.

Există multe motive pentru care o sarcină nu poate fi realizată după tratamentul cu FIV și transferul embrionului, inclusiv:

  • Este posibil ca timpul ovulației să fi fost interpretat greșit sau să nu fie prevăzut sau să nu apară.
  • Încercările de a obține ovocite care se dezvoltă în timpul ciclului controlat pot fi nereușite.
  • Oocitele obținute pot fi anormale sau pot fi deteriorate în timpul extracției.
  • Este posibil ca o probă adecvată de material seminal să nu fie disponibilă.
  • Fertilizarea ovocitelor pentru a genera embrioni poate să nu aibă loc.
  • Este posibil ca diviziunea celulară a ovocitelor fertilizate să nu aibă loc.
  • Este posibil ca embrionul să nu se dezvolte normal.
  • Este posibil ca implantarea să nu aibă loc.
  • Defecțiuni ale echipamentului, infecții sau erori umane sau alți factori neprevăzuți și incontrolabili, care pot duce la pierderea sau deteriorarea ovocitelor, a probei de spermă sau a embrionilor [3]

Potrivit unui studiu suedez din 2005 publicat în revista Oxford "Human Reproduction", 166 de femei au fost urmărite începând cu o lună înainte de ciclurile lor de FIV, iar rezultatele nu au arătat nicio corelație semnificativă între rezultatele FIV și stres.

Studiul sa încheiat cu recomandarea către clinici că, prin informarea pacienților cu FIV cu privire la rezultatele studiului, ar putea fi posibilă reducerea stresului experimentat în timpul protocolului de tratament.

Deși poate stresul psihologic experimentat în timpul unui ciclu poate să nu afecteze rezultatul FIV, este posibil ca experiența FIV să ducă la stres care crește șansele de depresie.

Numai consecințele financiare ale FIV (dacă se folosește o clinică privată) pot provoca anxietate și pot fi copleșitoare.

Cu toate acestea, pentru multe cupluri, alternativa este infertilitatea, iar experiența infertilității în sine poate provoca, de asemenea, stres și depresie.

Complicații

Cea mai mare complicație a FIV este riscul de sarcină multiplă. Acest lucru este direct legat de practica transferului embrionilor multipli pentru a crește rata sarcinii. Sarcinile multiple sunt asociate cu un risc crescut de avort spontan, complicații obstetricale, naștere prematură și morbiditate neonatală cu posibilitatea de rănire pe termen lung.

În multe țări există limite stricte ale numărului maxim de embrioni care pot fi transferați, pentru a reduce riscul de sarcină multiplă (triplete sau mai multe).

O diviziune spontană a embrionului poate apărea și în uter (ca într-o sarcină tradițională), dar acesta este un caz rar, care generează gemeni identici. Un studiu clinic randomizat dublu-orb a urmat sarcinilor după FIV care a generat 73 de bebeluși (33 de băieți și 40 de fete) și a concluzionat că 8,7% dintre bebelușii singuri și 54,2% dintre gemeni au avut o greutate la naștere

  • Abonați-vă la newsletter
  • riscul sarcină multiplă